Вакцина чумная живая сухая (Vaccinum pestosum vivum). Вакцины

Чума - инфекционное трансмиссивное заболевание, которое вызывается бактериями рода Иерсиний. Заболевание имело эпидемический характер в прошлом. Сейчас естественные очаги чумы не уменьшаются и охватывают около 10% суши. Заболевание протекает в нескольких клинических формах. Наиболее опасная - легочная. Больной легочной формой чумы представляет эпидемиологическую опасность для населения. Для борьбы с инфекцией разработана вакцина чумная живая сухая для инъекций, накожного скарификационного нанесения и ингаляций для профилактики чумы.

Вакцина чумная живая сухая для инъекций, накожного скарификационного нанесения и ингаляций для профилактики чумы: состав и форма выпуска

Вакцина выпускается в форме лиофилизата во флаконах объемом 2 миллилитра. В дальнейшем из этой субстанции готовится раствор для различных путей введения. В прививке используются живые ослабленные бактерии специального штамма. В процессе приготовления лиофилизата используют такие вещества: сахарозно-желатиновая среда, тиомочевина.

Препарат имеет беловато-желтоватой окрас и не должен содержать патологических примесей. После добавления физиологического раствора спустя несколько минут образуется гомогенная масса.

Фармакологическое действие вакцины

Вакцина против чумы используется для выработки специфического приобретенного иммунитета у людей, которые имеют риск заболеть данным заболеванием. В основе действия прививки лежит иммунологический ответ организма на попадание чужеродных антигенов (белков). Специфический иммунитет формируется в несколько этапов:

• Первый - поглощение бактерий, введенных в тело человека при помощи вакцины. Эту функцию выполняют специальные клетки - макрофаги. Они находятся во всех тканях человеческого тела. Макрофаги поглощают иерсинии и ферментируют их. В результате этого бактерии теряют свою клеточную структуру и освобождаются их антигены. Иммунные клетки выводят чужеродные белки на поверхность, чтобы сведенья об их структуре получили другие клетки, а именно лимфоциты.
• На втором этапе в работу вовлекаются Т- и В-лимфоциты. Различные виды этих клеток выполняют свои отдельные, но очень важные функции. Например, Т-лимфоциты формируют иммунологическую память, уничтожают клетки тела, пораженные бактериями или вирусами. В-лимфоциты после получения сведений о патологическом агенте превращаются в плазматические клетки. Последние выполняют одну из важнейших функций иммунитета - выработку иммуноглобулинов (антител).

В результате действия вакцины в организме человека вырабатывается значительное количество специфических антител, которые нейтрализуют возбудителя чумы. Иммуноглобулины продолжают циркулировать в крови на протяжении одного года, создавая иммунитет против инфекции. Однако их уровень постепенно снижается, поэтому при необходимости проводится ревакцинация.

Показания и подготовка для введения прививки

Показание к иммунопрофилактике чумы - наличие вспышки заболевания среди грызунов. Именно они переносчики инфекции. Вакцинацию также проводят в тех случаях, когда существует возможность заражения чумой от больного человека. Вопрос о необходимости вакцинации решается совместно с доктором. Подготовка к прививанию состоит из сбора сведений о состоянии здоровья пациента, перенесенных заболеваниях и травмах. Затем доктор проводит осмотр больного.

Важно! Термометрия - обязательная процедура перед прививанием

Когда нет противопоказаний к иммунопрофилактике, проводят прививание. Данную манипуляцию проводит доктор или специально обученный медицинский персонал.

Способ применения вакцины от чумы

Вакцинацию против чумы начинают с определения пригодности вакцины. Медработник визуально оценивает флакон с лиофилизатом на наличие трещин в стекле, изменение цвета и консистенции препарата, присутствия примесей. Затем проверяется наличие маркировки и срока годности. После лиофилизат разводится необходимым количеством физиологического раствора. Для каждого пациента используются отдельный одноразовый шприц (или игла) и стерильные перчатки.

Существует четыре способа введения вакцины. Они представлены в таблице:

Способ введения	Техника выполнения
Накожный способ	Место вакцинации: внутренняя поверхность предплечья. Кожу в месте введения препарата предварительно очищают и протирают 70%-м раствором этилового спирта. Затем специальной иглой проводят легкое соскабливание эпидермиса в трех местах. На каждое из этих мест наносят по одной капле вакцины. Через каждую из них проводят по 8 линейных поверхностных штрихов в крестообразном направлении. Штрихи должны быть неглубокими, чтобы не вызывать значительную кровоточивость. После этого препарат на протяжении нескольких секунд интенсивно втираю в кожу. Прививочная доза составляет 0,15 мл
Подкожный способ	Место прививания - нижний угол лопатки. Кожа предварительно обрабатывается раствором антисептика. 0,5 мл вакцины вводится строго подкожным методом. Достичь этого возможно только при правильном положении шприца. Угол между ним и кожей при подкожном введении должен составлять 40-45⁰. После выполнения инъекции место укола повторно обрабатывается антисептиком
Подкожный безыгольный способ	В этом случае используется специальный инъектор, который предварительно стерилизуется. Одна прививочная доза составляет 0,5 мл. Объем препарата варьирует в зависимости от возраста пациента. Инъекция проводится только в область дельтовидной мышцы
Внутрикожный безыгольный метод	Обработка кожи, как и при предыдущих методах. Прививочная доза - 0,1 мл. После введения препарата на этом месте появляется незначительная папула, которая рассасывается на протяжении последующих нескольких часов

Совет врача. В случаях, когда прививание проводилось внутрикожным или подкожным методами необходимо находиться под наблюдением медработника не менее часа. В редких случаях у пациента в ответ на прививку может возникнуть шоковое состояние

Противопоказания для введения вакцины

Противопоказание к вакцинации - наличие инфекционного заболевания в активной стадии. Прививка возможна только спустя один месяц после полного выздоровления. Вакцину нельзя применять при наличии заболеваний со стороны таких органов и систем:

• Желудочно-кишечный тракт - язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки.
• Сердечно-сосудистая система - инфаркт миокарда, нестабильная стенокардия, гипертоническая болезнь ІІІ степени.
• Мочеполовая система - заболевания, которые сопровождаются почечной недостаточностью последних стадий.

Иммунопрофилактику чумы не проводят у больных с декомпенсированным сахарным диабетом, тяжелым тиреотоксикозом, заболеваниями центральной нервной системы. Препарат не применяют на фоне использования стероидных средств и антиметаболитов.

Побочные действия и осложнения прививания

После введения препарата возникают некоторые местные проявления и изменения общего состояния пациента, которые считаются нормальными и не несут опасности. При накожном методе введения иногда возникает отечность, мелкая сыпь и инфильтрация. При внутрикожном и подкожном введении возникает покраснение кожи, припухлость в месте инъекции. Изменения состоят в недомогании, головных болях, незначительном повышении температуры тела.

К патологическим поствакцинальным реакциям относят:

• Развитие лимфаденита - воспаления близлежащих лимфатических узлов.
• Гипертермия - повышение температуры тела выше 38⁰ С.
• Аллергические реакции: крапивница, анафилактический шок.

Обо всех случая возникновения поствакцинальных реакций нужно немедленно сообщить доктору.

Взаимодействие с другими иммунобиологическими препаратами

Препарат нельзя использовать параллельно с другими живыми вакцинами. Иммунопрофилактика на фоне приема иммунодепрессантов (средств, которые угнетают иммунную систему) часто бывает не эффективной, поскольку иммунитет, который вырабатывается, не имеет достаточную силу.

Условия хранения и срок годности вакцины

Срок годности препарата зависит от используемого консерванта и составляет:

• 2 года при использовании сахарозо-желатиновой среды с тиомочевиной.
• 3 года при использовании сахарозо-желатиновой среды с глутаминово-кислым натрием.

Препарат хранят в специальном оборудовании при температуре от -20 до +6 градусов по Цельсию.

Аналоги препарата

На фармацевтическом рынке выпускается оральная вакцина для профилактики чумы. Форма выпуска: таблетки в упаковках по 40 или 90 штук. Вакцинация при помощи этой вакцины проводится пациентам старше 14 лет. Ревакцинация - через год по эпидемиологическим показаниям.

Торговое название: Вакцина чумная живая (Vaccinum pestosum vivum)

Международное название: Вакцина для профилактики чумы& (Vaccine plague)

Фармакологическая группа: МИБП-вакцина

Фармакологическая группа по АТХ: J07AK01. Чумная вакцина - инактивированные цельные бактерии

Состав:

Вакцина чумная живая, лиофилизат для приготовления суспензии для инъекций, накожного скарификационного нанесения и ингаляций, представляет собой лиофилизированную живую культуру вакцинного штамма чумного микроба Yersinia pestis EV линии НИИЭГ, стабилизаторы: сахароза, желатин, тиомочевина.

Описание:

Пористая масса серовато-белого цвета.

Фармакодинамика:

Вакцина вызывает развитие иммунитета к чуме длительностью до одного года.

Показания к применению:

Профилактика чумы. Прививкам подлежат дети с 2-х лет и взрослые, проживающее на энзоотичных по чуме территориях, а также лица, работающие с живыми культурами возбудителя чумы.

Противопоказания:

Острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения - прививки проводят не ранее, чем через 1 мес после выздоровления (ремиссии).

Первичные и вторичные иммунодефициты. При лечении стероидными препаратами, антиметаболитами, химио- и рентгенотерапии - прививки проводят не ранее, чем через 6 мес после окончания лечения.

Системные заболевания соединительной ткани.

Злокачественные новообразования и злокачественные болезни крови.

Распространенные рецидивирующие заболевания кожи (при накожной иммунизации).

Хронические заболевания органов дыхания (при ингаляционной иммунизации). Аллергические заболевания (бронхиальная астма, анафилактический шок, отек Квинке в анамнезе).

Беременность и период лактации.

Режим дозирования:

Вакцинацию проводят однократно подкожным, накожным, внутрикожным или ингаляционным способами. Ревакцинацию осуществляют накожным способом через один год, при неблагоприятной эпидемической обстановке - через 6 мес.

Вакцинация накожным, подкожным и внутрикожным способами.

Перед вскрытием каждую ампулу просматривают. Не подлежит применению препарат, целостность упаковки которого повреждена, с измененными физическими свойствами (посторонние примеси, не растворяющиеся хлопья), с истекшим сроком годности, при нарушении режима хранения.

Вскрытие ампул и процедуру введения препарата осуществляют при строгом соблюдении правил асептики и антисептики. Разведенная вакцина, сохраняемая с соблюдением правил асептики, может быть использована в течение 2 ч. Перенос вскрытой ампулы из одного помещения в другое не допускается. Неиспользованную вакцину уничтожают кипячением в течение 30 мин.

Непосредственно перед иммунизацией вакцину разводят 1,8 мл 0,9% раствора натрия хлорида для инъекций. Препарат должен полностью раствориться в течение 3 мин. Ампулы с вакциной встряхивают. Растворенная вакцина - гомогенная взвесь без посторонних примесей и хлопьев. Полученную взвесь отбирают с помощью стерильного шприца из ампулы и переносят в стерильный флакон, содержащий 0,9% раствор натрия хлорида для инъекций в объеме, соответствующем таковому, указанному на этикетке коробки для соответствующего способа введения. При этом учитывают объем 0,9% раствора натрия хлорида, использованного для приготовления исходного разведения.

В зависимости от возраста прививаемых и способа введения используют следующие дозы вакцины.

ДОЗЫ ДЛЯ ВАКЦИНАЦИИ

Возраст прививае- мых	Доза вакцины (количество живых микробных клеток) для введения способом...
	внутрикожным	подкожным	накожным	ингаляцион- ным
14-60 лет - 1)	1 доза-300 млн живых микробных клеток (ж.м.к.) в,1 мл	1 доза-300 млн ж.м.к. в,5 мл	1 доза - 3 млрд ж.м.к. в 0,15 мл (3 капли)	1 доза - млрд ж.м.к. в,15 мл
Старше 60 лет	1/3 дозы - 100 млн ж.м.к. в 0,1 мл	Не прививают	1 доза - 3 млрд ж.м.к. в 0,15 мл (3 капли)	Не прививают
10-13 лет	1/2 дозы - 150 млн ж.м.к. в,1 мл	Не прививают	1 доза - 3 млрд ж.м.к. в 0,15 мл (3 капли)	Не прививают
7-9 лет	1/3 дозы - млн ж.м.к. в 0,1 мл	Не прививают	2/3 дозы - 2 млрд ж.м.к. в 0,1 мл (2 капли)	Не прививают
2-6 лет	1/3 дозы - млн ж.м.к. в 0,1 мл	Не прививают	1/3 дозы- 1 млрд ж.м.к. в 0,05 мл (1 капля)	Не прививают
Примечание - 1)- женщин, кормящих грудью, прививают только накожно

Накожный способ.

Вакцинацию проводят на наружной поверхности средней трети плеча следующим образом: взрослым оспопрививательным пером слегка соскабливают (до покраснения) поверхностный слой эпидермиса на 3-х участках кожи, предварительно обработанной 70град. этиловым спиртом. Расстояние между участками составляет от 3-х до 4-х см, площадь участка от 1 до 1,5 см2. При вакцинации детей эпидермис соскабливают на 1 или 2 участках кожи.

На каждый участок скарифицированной кожи пипеткой наносят по 1 капле вакцины, после чего индивидуальным оспопрививательным пером через каждую каплю вакцины крестообразно наносят 4 горизонтальные и 4 вертикальные линейные насечки длиной 1 см. Затем оспопрививательным пером в течение нескольких секунд тщательно втирают капли вакцины в скарифицированную кожу и дают подсохнуть в течение 5 мин. Насечки следует делать неглубокие, чтобы они не кровоточили (кровь может выступать только в виде мелких росинок). Для каждого прививаемого используют отдельное одноразовое оспопрививательное перо. Запрещается взамен перьев пользоваться иглами, скальпелями и т.п.

Подкожный способ.

Категорически запрещается использовать вакцину, разведенную для накожного применения! Кожу в месте инъекции предварительно обрабатывают 70град. этиловым спиртом. Вакцину вводят шприцем ниже угла лопатки или безыгольным инъектором БИ-ЗМ с противоинфекционным протектором ППИ-2 в верхнюю треть плеча позади дельтовидной мышцы.

Внутрикожный способ.

Количество доз и объем растворителя для подростков с 14 лет и взрослых до 60-ти лет указаны на этикетке коробки. Для вакцинации детей в возрасте 10-13 лет объем растворителя при втором разведении удваивают, для вакцинации детей в возрасте от 2 до 9 лет и взрослых старше 60 лет объем растворителя утраивают. Вакцину взрослым и детям вводят в объеме 0,1 мл внутрикожно в область наружной поверхности плеча левой руки после обработки кожи 70град. этиловым спиртом с помощью безыгольного инъектора БИ-ЗМ с протектором противоинфекционным ППИ-2 или шприцем объемом 1 мл с тонкой иглой с коротким срезом.

Вакцинация ингаляционным способом.

Вакцинацию проводят в специальных помещениях стационарного или временного типа объемом от 50 до 150 м3, высотой от 2,5 до 4,5 м (соотношение длины и ширины не более чем 2:1). Указанные помещения должны быть приспособлены для быстрого проветривания, а стационарные ингаляционные должны быть оборудованы вытяжной вентиляцией.

Вакцину разводят 2 мл стерильного 10% раствора лактозы. Ампулу встряхивают до получения гомогенной взвеси. При обнаружении посторонних примесей, неравномерной взвеси использовать препарат запрещается. Полученную взвесь переносят в стерильный флакон с необходимым для дальнейшего разведения объемом 10% раствора лактозы (согласно указанию на коробке). При этом учитывают объем 10% раствора лактозы, использованный для приготовления исходного разведения. Температура 10% раствора лактозы должна соответствовать температуре, при которой хранился сухой препарат перед разведением.

Полученную микробную суспензию в количестве, определяемом объемом помещения (0,1 мл на 1 м3 помещения), заливают в резервуар распылителя. Распыление производится с помощью пневматического распылителя эжекционного типа. Распылитель устанавливается вертикально, соплом вверх, в центре помещения на высоте 80-120 см от пола. Распыление производят сжатым воздухом под давлением 1,2 атм до полного израсходования суспензии, залитой в резервуар. Сжатый воздух подается на распылитель до конца сеанса иммунизации. Продолжительность сеанса иммунизации 5 мин. Одна человеко-доза для ингаляционного применения составляет (5+/-3)х106 живых микробных клеток.

Число людей, иммунизированных за один сеанс, определяется из расчета от 1,4 до 2 м3 помещения на одного человека.

После каждого сеанса иммунизации ингаляционную вентилируют не менее 5 мин. При проведении иммунизации в палатке после каждого сеанса откидывают пологи не менее, чем на 5 мин. Персонал, проводящий вакцинацию, в случае необходимости входа в ингаляционную в течение сеанса и первых 5 мин после его окончания, должен быть одет в специальную одежду (нательное белье, носки, хлопчатобумажный комбинезон, противогаз, тапочки).

Проведенные разными способами прививки регистрируют в установленных учетных формах с указанием наименования препарата, изготовителя, даты прививки, дозы, способа введения, номера серии, срока годности, реакции на прививку.

Реакция на введение. После накожной вакцинации через 24-48 ч на месте введения вакцины могут возникнуть гиперемия и инфильтрат с последующим образованием по ходу насечек корочек желтоватого цвета.

Побочные действия:

Прививки вакциной чумной живой могут сопровождаться как общей, так и местной реакциями, интенсивность которых зависит от метода вакцинации.

Накожная прививка может сопровождаться мелкой везикулярной сыпью по ходу насечек, иногда на месте прививки появляется инфильтрат в толще кожи. Реже наблюдаются регионарные лимфадениты. Указанные симптомы начинают появляться через 8-10 ч после прививки, достигают полного развития через 23-30 ч. Общая реакция возникает на первые сутки и выражается повышением температуры до 37,5 град. С.

После подкожных и внутрикожных прививок могут наблюдаться местные реакции в виде гиперемии, болезненности, инфильтрата диаметром до 50 мм, реже - увеличение регионарных лимфатических узлов. Местные реакции возникают через 6-10 ч, достигают полного развития через 24-48 ч и исчезают через 4-5 сут. Общая реакция выражается в недомогании, головной боли, повышении температуры до 37,5 град. С, у одного процента вакцинированных до (38,0-39,0) град. С продолжительностью до 3 сут. Иногда наблюдаются тошнота и рвота.

После ингаляционной иммунизации у небольшого числа вакцинированных возможно возникновение недомогания, головной боли, болей в мышцах, повышения температуры до 38,5 град. С и очень редко до 40 град. С. Продолжительность реакции 1-3 сут. По времени возникновения наблюдаются два типа реакции: ранние, развивающиеся в первые двое суток и характерные для повторно прививаемых; поздние, появляющиеся на 5-7 сут, и чаще встречающиеся у первично привитых.

Перед массовым применением каждая серия вакцины должна быть испытана на группе людей в 50-100 человек, равнозначной по возрасту и состоянию здоровья основному контингенту прививаемых. Вакцина может быть использована для массовой вакцинации, если количество средних (повышение температуры тела до 37,6-38,5 град. С) и сильных (повышение температуры тела выше 38,5 град. С) реакций на ее введение не превышает соответственно 29% и 5% при подкожном методе введения, 1% средних реакций при накожном введении и 6% средних или 4% сильных реакций для ингаляционного метода введения.

Взаимодействие:

Не допускается введение вакцины чумной живой в сочетании с применением антибиотиков стрептомицинового, тетрациклинового ряда и сульфаниламидов в терапевтических дозах одновременно и ранее, чем через 14 дней после иммунизации.

Допускается одновременная накожная вакцинация взрослых против чумы, бруцеллеза и туляремии на разных участках наружной поверхности верхней трети плеча.

Срок годности:

Срок годности - 3 года. Препарат с истекшим сроком годности применению не подлежит.

Условия хранения:

Хранят в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 0 до 8 град. С в недоступном для детей месте.

Транспортируют в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 0 до 8 град. С.

Дата актуализации инструкции 20.01.2014

Производитель: , Россия

Формы выпуска: лиофилизат для приготовления концентрата для приготовления раствора для инфузий, флакон

Условия отпуска:

Данные гос. регистрации: ЛП-000535 от 12.05.2011

Дата переоформления РУ: 05.11.2014

окончание срока действия 12.05.2016

Номер фармстатьи: ЛП 000535-120511

Производитель: , Россия

Владелец регистрационного удостоверения: 48 Центральный научно-исследовательский институт Министерства обороны Российской Федерации (ЦНИИ Минобороны России) ФГБУ, Россия

Формы выпуска: лиофилизат для приготовления суспензии для инъекций, накожного скарификационного нанесения и ингаляций 1 флакон содержит от 80 до 430 подкожных доз для в, Пенициллиновые флаконы из стекла, закрытые пробками

Условия отпуска: для лечебно-профилактических учреждений

Данные гос. регистрации: ЛП-000535 от 12.05.2011

Дата переоформления РУ: 05.11.2014

Состояние регистрационного удостоверения: действующее

Номер фармстатьи: ЛП 000535-120511

Производитель: , Россия

Владелец регистрационного удостоверения: Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт ФГУЗ, Россия

Формы выпуска: лиофилизат для приготовления суспензии для инъекций, накожного скарификационного нанесения и ингаляций, ампулы

Условия отпуска: для лечебно-профилактических учреждений

Данные гос. регистрации: ЛСР-005759/08 от 22.07.2008

Дата переоформления РУ: 19.08.2013

Состояние регистрационного удостоверения: действующее

Номер фармстатьи: ФСП 42-8654-07

Производитель: , Россия

Владелец регистрационного удостоверения: 48 Центральный научно-исследовательский институт Министерства обороны Российской Федерации (ЦНИИ Минобороны России) ФГБУ, Россия

Формы выпуска: таблетки для рассасывания, банки

Условия отпуска: для лечебно-профилактических учреждений

Данные гос. регистрации: ЛСР-008997/09 от 09.11.2009

Дата переоформления РУ: 05.11.2014

Состояние регистрационного удостоверения: действующее

Номер фармстатьи: ЛСР-008997/09-091109

Производитель: Научно-исследовательский центр (в/ч 23527, дислокация г. Киров) , Россия

Владелец регистрационного удостоверения: 33 Центральный научно-исследовательский испытательный институт Министерства обороны Российской Федерации ФБУ, Россия

Открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Сотрудники Саратовского филиала Федерального исследовательского центра вирусологии и микробиологии изучили, какие антитела и механизмы клеточного иммунного ответа активирует чумная живая вакцина у человека. Они выяснили, что присутствие в крови испытуемых специфических антител к белку Pla (активатору плазминогена чумы) служит надежным показателем успешной вакцинации. Научная опубликована в журнале PLoS Neglected Tropical Diseases .

Чума - это инфекционное заболевание, вызываемое бактерией Yersinia pestis (чумной палочкой). Инфекция переносится блохами, живущими на грызунах, в том числе на обильно населяющих города крысах. В прошлом чума уничтожала европейцев миллионами. За последние несколько десятилетий число случаев заражения удалось существенно снизить с помощью вакцинации. Однако это заболевание по-прежнему часто встречается в развивающихся странах. Чтобы препятствовать его распространению, необходимо хорошо понимать, как работает чумная вакцина, и повышать ее эффективность.

Саратовские биологи начали масштабную работу по выявлению механизмов действия живой чумной вакцины. Для этого они взяли образцы крови у 34 добровольцев 26-72 лет, неоднократно привитых против чумы втиранием взвеси живых микробов в специально поврежденную кожу, а также у 17 здоровых непривитых людей того же возраста. Позже людей первой группы разделили на тех, кто проходил вакцинацию менее чем за год до анализа крови (13 человек), и тех, кому делали прививку за год и более до участия в этом исследовании (остальные 21). Ученых интересовало состояние мононуклеарных лимфоцитов в крови испытуемых. Эти клетки обеспечивают иммунный ответ на вторжение в организм различных бактерий, в том числе и чумной палочки.

Исследователи определили, в каких количествах мононуклеарные лимфоциты привитых и непривитых от чумы граждан выделяют вещества, помогающие бороться с бактериями: гамма-интерферон (IFN-γ), фактор некроза опухоли альфа (ФНО-α), а также интерлейкины 4, 10 и 17А. Перед определением содержания названных молекул в мононуклеарных клетках кровь очистили от следов живой чумной вакцины - клеток Yersinia pestis и их фрагментов. В полученные от каждого испытуемого «очищенные растворы» мононуклеарных лимфоцитов добавили белок Pla - активатор плазминогена чумы, фермент чумной палочки, способствующий ее распространению по организму инфицированного и подавление иммунной реакции на Yersinia pestis .

Оказалось, что мононуклеарные лимфоциты вакцинированных выделяют существенно больше интерлейкинов 4 и 10, а также ФНО-α и IFN-γ в ответ на присутствие Pla. Клетки из крови привитых менее года назад были чуть более активны, чем лимфоциты привитых ранее, но эта разница не была статистически значимой. Тем не менее по какой-то причине мононуклеарные лимфоциты не вакцинированных от чумы испытуемых при наличии Pla производят в 3,4 раза больше интерлейкина-4, чем аналогичные клетки из крови привитых. И чем больше раз человеку вводили живую чумную вакцину в прошлом, тем меньше интерлейкина-4 в эксперименте вырабатывали его лимфоциты.

Также исследователи определили в крови испытуемых уровни антител из различных классов иммуноглобулинов, реагирующих на присутствие активатора плазминогена чумы Pla. Многие из них связывались не только с Pla, но и с другими белками. Когда ученым удалось выделить именно те антитела, которые реагируют только на присутствие Pla, оказалось, что больше всего их образуется у тех, кто был вакцинирован относительно давно. Как и в случае с интерлейкином-4, многократные прививки против чумы приводили к тому, что антител из подклассов иммуноглобулинов G1 и G2 в ответ на активатор плазминогена чумы вырабатывалось меньше. Однако в крови многократно привитых в присутствии Pla обнаруживали специфические антитела к этому белку из подкласса иммуноглобулинов G3, а у невакцинированных их не встречали. Напротив, антитела к активатору плазминогена чумы из подкласса иммуноглобулинов G4 присутствовали только у непривитых.

Из полученных данных авторы сделали вывод, что по иммунной реакции организма на активатор плазминогена чумы Pla можно судить об эффективности вакцинации, хотя Pla не единственное вещество, вырабатываемое чумной палочкой и провоцирующее иммунный ответ в теле человека. Однако при этом надо четко отслеживать, выделение и активация каких веществ связаны с появлением Pla в организме, а какие происходят неспецифически. Также ученые предполагают, что многократные введения живой чумной вакцины могут и не повышать эффективность защиты от чумы, так как уровень интерлейкина-4 и антител из подклассов иммуноглобулинов G1 и G2 в крови с каждой вакцинацией падает.

Пассивная иммунизация . В отличие от вакцин, протективная активность которых проявляется не ранее чем через 5-7 сут после введения и зависит от способности макроорганизма к адекватному иммунному ответу, введение готовых специфических антител является средством немедленной защиты от инфекции независимо от индивидуального иммунного статуса. Антитела слаботоксичны и высокоизбирательны. Продолжительность напряженного иммунитета может достигать нескольких недель за счет того, что некоторые изотипы человеческого IgG имеют период полужизни более 30 сут. Протективные свойства моноклональных антител к F1- и V-антигену Y. pestis продемонстрированы при моделировании как бубонной, так и легочной формы чумы.

В последние годы с появлением новых технологий: гибридом, бактериальных, векторных и фаговых систем - произошел прорыв в технологии производства профилактических и лечебных иммуноглобулинов.

Уже более 20 лет лицензированы восемь моноклональных антител для клинического применения, причем три из них - гетерогибридомные (мышь-человек), пять - «гуманизиро-ванные» мышиные моноклональные антитела. Однако среди них профилактических или лечебных лицензированных противочумных моноклональных антител нет, что предположительно можно объяснить высокой степенью агрессивности возбудителя чумы, скоротечностью патологического процесса и сложностью до конца не изученного пато- и иммуногенеза чумы с преобладанием системы клеточной защиты организма.

Активная иммунизация . УБИТЫЕ ЦЕЛЬНОКЛЕТОЧНЫЕ ВАКЦИНЫ. Вакцинопрофилактика чумы насчитывает более 100 лет. Первые вакцины были приготовлены из убитых различными способами бактерий чумы в конце XIX - начале XX в. Наиболее широкое распространение, особенно в Индии, получила инактивированная нагреванием и консервированная фенолом вакцина Хавкина. Она способствовала снижению заболеваемости и смертности от чумы при испытаниях в очагах эпидемий. На основании многолетнего опыта массовых прививок убитыми корпускулярными вакцинами в Манчжурии, на Яве и Мадагаскаре исследователи пришли к заключению, что люди приобретают относительный иммунитет к чуме, о чем свидетельствовали случаи заболевания среди привитых, хотя и реже, чем у невакцинированных пациентов.

Опасаясь реверсии вирулентности живой противочумной вакцины EV, превосходящей по эпидемиологической эффективности убитые вакцины, и ссылаясь на ее высокую реактогенность, специалисты в США разработали противочумную вакцину USP, состоящую из убитых формальдегидом микробов вирулентного штамма Y. pestis 195Р. Эта вакцина была лицензирована и выпускалась с 1946 по 1998 г. Аналогичную USP противочумную вакцину из вышеназванного штамма производят в Австралии; она лицензирована для клинического применения только внутри страны. Вакцину вводят двукратно с интервалом 1-4 нед и затем осуществляют бустерную прививку через 6 мес. Жидкая противочумная инактивированная вакцина I.P., представляющая собой усовершенствованную вакцину Хавкина, производится в Индии.

ЖИВЫЕ АТТЕНУИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ. Массовое применение живых вакцин в 1920-30-е гг. в эндемичных по чуме очагах дало убедительные доказательства их безопасности и эффективности по сравнению с убитыми противочумными вакцинами. При этом живая противочумная вакцина в зависимости от условий применения и инфицирующей дозы в определенной степени защищала от легочной формы чумы. За прошедшие десятилетия живой противочумной вакциной были привиты миллионы людей без каких-либо серьезных осложнений. Из множества предложенных для применения чумных аттенуированных вакцинных штаммов наибольшим преимуществом обладал штамм Y. pestis EV, полученный французскими учеными Жираром и Робиком в результате ежемесячных пересевов на питательном агаре при температуре 18-20 °С в течение 5 лет. В 1936 г. вакцинный штамм EV был передан Жираром из Пастеровского института в г. Тананариве (о. Мадагаскар) советским ученым.

С 1942 г. в СССР были организованы массовые прививки чумной живой вакциной ЕВ. В настоящее время коммерческую (лицензированную) противочумную живую сухую вакцину из штамма Y. pestis EV линии НИИЭГ для чрескожного и аэрозольного применения производят в РФ в Ставропольском противочумном институте, а в 48-м ЦНИИ МО РФ (г. Киров) выпускается препарат и для при-менения внутрь. Аналогичную вакцину (кроме таблеток) производят в бывшем Алма-Атинском противочумном институте. Следует отметить, что коммерческую противочумную живую вакцину выпускают также в Индонезии из другого аттенуированного штамма Y. pestis - Харбин. В соответствии с современными достижениями биотехнологии, микробиологии, биохимии в РФ производство противочумной живой сухой вакцины на всех этапах технологического процесса, начиная от приготовления посевного материала и заканчивая лиофильной сушкой препарата и фасовкой готовой продукции, постоянно совершенствуется.

Препарат представляет собой лиофилизированную живую культуру вакцинного штамма чумного микроба ЕВ линии НИИЭГ со стабилизатором. Вакцинацию проводят однократно подкожным, накожным, внутрикожным или ингаляционным способом. Для формирования иммунитета против легочной чумы предпочтительнее инга-ляционный способ введения вакцины. При чрескожной иммунизации чувствительных к чуме животных вакцинным штаммом ЕВ альвеолярные макрофаги, в отличие от перитонеальных, претерпевают изменения, не затрагивающие их бак-терицидную активность и не сопровождающиеся перераспределением их субпопу-ляций. В то же время аэрогенная иммунизация вызывает более интенсивную по сравнению с перитонеальными клетками активацию альвеолярных макрофагов, вследствие чего происходит перераспределение субпопуляций и перестраивается характер фагоцитоза - от незавершенного к завершенному. 

СУБЪЕДИНИЧНЫЕ (ХИМИЧЕСКИЕ) ВАКЦИНЫ. К препаратам I поколения чумных вакцин относятся убитые корпускулярные и живые аттенуированные вакцины; II поколение представлено химическими (субъединичными) вакцинами на основе протективных антигенов.

В настоящее время в связи с прекращением производства в 1998 г. в США противочумной вакцины USP интенсивно проводятся исследования по созданию химической вакцины, в состав которой входят протективные антигены Y. pestis. Наиболее эффективной считают химическую противочумную вакцину, содержащую капсульный FI- и V-антиген, которая в экспериментах на лабораторных животных, в том числе на приматах, защищает их от бубонной и легочной чумы, вызванной как F, так и F-штаммами Y. pestis (в отличие от вакцины USP, обладающей защитным эффектом, в основном против чрескожного заражения), причем протективной активностью обладает в отдельности как капсульный FI-антиген, так и (в большей степени) V-антиген, в том числе V-антиген Y. pseudotuberculosis. Проведенные недавно клинические испытания на 145 добровольцах субъединич- ной чумной вакцины (rFI+rV) показали ее безопасность и иммуногенность. В РФ разрабатывают чумную химическую вакцину, состоящую из капсульного антигена FI Y. pestis и основного соматического антигена Y. pseudotuberculosis. Ее назначение - ревакцинация людей, изначально вакцинированных живой противочумной вакциной, которая создает полноценный грунд-иммунитет Отметили высокую протективную активность на беспородных мышах антигенного препарата субклеточных фракций Y. pestis и подтвердили активность субклеточных фракций в смеси с суммарной ДНК Y. pestis, обладающей ярко выраженной способностью активировать как неспецифическую, так и специфическую резистентность организма у человека и животных.

Вакцины - препараты, служащие для создания активного искусственного приобретенного иммунитета. В настоящее время известны следующие вакцинные препараты:

1) живые вакцины, представляющие собой ослабленные в своей вирулентности различные микроорганизмы;

2) убитые, содержащие инактивированные возбудители заболеваний;

3) химические, состоящие из растворимых антигенов бактерий, извлеченных химическими методами;

4) анатоксины, обезвреженные формалином экзотоксины возбудителей токсинемических инфекций.

Препараты, предназначенные для проведения иммунизации против одной какой-нибудь инфекции, получили название моновакцины; против двух инфекционных заболеваний - дивакцины; против трех - тривакцины; против нескольких инфекций - поливакцины. Ассоциированными вакцинами называются препараты, содержащие смесь из антигенов различных бактерий и анатоксинов. Применение ассоциированных вакцин, таких как АКДС (см. с. 19) или TABte (см. с. 17) дает возможность создавать иммунитет в отношении нескольких инфекций и сокращать число прививок.

Поливалентными вакцинами принято называть препараты, которые включают несколько разновидностей или серологических типов возбудителей одной инфекции (например, противогриппозные, лептоспирозные и др.).

Живые вакцины

Живые вакцины представляют собой мутанты, то есть вакцинные штаммы микроорганизмов с остаточной вирулентностью, не способные вызывать специфические заболевания, но сохранившие способность размножаться и находиться в организме, приводя к развитию бессимптомной вакцинной инфекции.

Вакцинные штаммы для приготовления живых вакцин были получены различными путями: методом отбора (селекции) мутантов с ослабленной вирулентностью, методом экспериментального направленного изменения вирулентных свойств возбудителя, длительным пассированием в организме животных, методом генетического скрещивания (получения реком-бинантов).

Селекция широко использовалась исследователями при отборе среди лабораторных штаммов спонтанно возникших Мутантов с ослабленной вирулентностью. Так были получены чумная, бруцеллезная, туляремийная вакцины, сибиреязвенная, полиомиелитная и другие.

Метод направленного изменения вирулентности микроорганизмов, связанный с длительным культивированием при неблагоприятных условиях, был разработан Л. Пастером. Пастер, изучая возбудителя куриной холеры, однажды оставил культуры в термостате на длительный срок без пересева. Зараженные этими культурами куры не заболевали и что еще более важно - при последующем введении свежих вирулентных возбудителей холеры, не реагировали заболеванием.

Это наблюдение легло в основу обобщающего вывода, что аттенуированные (т. е. ослабленные в своей вирулентности) микроорганизмы обладают способностью вызывать невосприимчивость к вирулентным возбудителям заболеваний. Таким образом, Л. Пастер разработал научные основы получения живых вакцин, установив возможность искусственного ослабления вирулентности патогенных микроорганизмов. Основываясь на своих наблюдениях по получению аттенуированной культуры куриной холеры, Пастер уже целенаправленно создает вакцину против сибирской язвы. Сибиреязвенная вакцина была получена при длительном выращивании сибиреязвенных бацилл при повышенной температуре 42°С (см. с. 8), что и привело к ослаблению вирулентности (действие физического фактора).

Двум французским микробиологам А. Кальметту и Г. Герену удалось получить вакцинный штамм (БЦЖ) пассированием микобактерий туберкулеза бычьего типа на среде с желчью. Желчь и явилась тем фактором, который вызвал снижение вирулентности (воздействие химического вещества).

Л. Пастером была получена вакцина против бешенства (см. с. 10) как результат длительного пассирования вируса уличного бешенства в организме одного и того же вида животных- на кроликах. Многократное пассирование через мозг кролика привело к тому, что вирус максимально адаптировался к мозгу кролика, резко возросла вирулентность вируса для кролика и снизилась для человека и других животных.

В последние годы был применен еще один метод для получения вакцинных штаммов, основанный на использовании генетических скрещиваний, результатом которых являются рекомбинанты со сниженной вирулентностью. Так был получен вакцинный штамм вируса гриппа А при взаимодействии авирулентного исходного штамма (содержащего гемагглютинин Н 2 и нейраминидазу N 2) и вирулентного штамма Гонконг (H 3 N 2). Рекомбинант содержал гемагглютинин Н 3 вирулентного вируса Гонконг и сохранил авирулентность исходного вакцинного штамма.

Живые вакцины имеют целый ряд преимуществ в сравнении с другими видами вакцин, и связано это свойство с тем, что пребывание и размножение в организме человека и животных аттенуированных вакцинных штаммов приводит к развитию вакцинной инфекции (специфического инфекционного заболевания без выраженных клинических симптомов). Вакцинная инфекция, проявляясь ли в виде местного воспалительного процесса или сопровождаемая общей реакцией организма, всегда влечет за собой перестройку иммунобиологических свойств организма и выражается в выработке специфического иммунитета.

Живые вакцины, как правило, вводятся однократно и более простыми способами (перорально, интраназально, накожно, реже подкожно). Способность вакцинного штамма размножаться и присутствие в организме постоянного антигенного раздражителя обеспечивает напряженный, прочный и довольно длительный иммунитет.

К вакцинным штаммам предъявляются следующие основные требования:

а) наличие остаточной вирулентности;

б) достаточная иммуногенность;

в) отсутствие возможности реверсии к исходным свойствам.

Таким образом, вакцинные штаммы должны обладать стойкими, наследственно закрепленными аттенуированными свойствами.

Для сохранения жизнеспособности и стабильности свойств большинство живых вакцин выпускают в сухом виде, что достигается методом лиофилизации - высушивание из замороженного состояния под глубоким вакуумом. Сухие вакцины могут сохраняться в течение года и более при температуре холодильника (не выше 4°-8°С).

В настоящее время в практике применяются следующие живые вакцины.

1. Сибиреязвенная вакцина - первая живая вакцина, которая была получена в 1881 г. Л. Пастером.

Пастер выдерживал культуру возбудителя сибирской язвы в термостате при температуре 42° в течение 12 и 24 дней, получив таким образом два вакцинных штамма: 12-дневный (более вирулентный) и 24-дневный (более ослабленный). Инкубация при такой неблагоприятной температуре привела к частичному снижению вирулентности и утрате способности образовывать споры.

В России по методу, предложенному Пастером, самостоятельно создал вакцину против сибирской язвы Л. С. Ценковский, которая и использовалась для вакцинации животных с 1883 г. по 1942 г.

В 1940 году Н. Н. Гинзбургом и А. Л. Тамариной при культивировании на особых питательных средах отобран бескапсульный вариант сибиреязвенных бацилл, получивший название СТИ-1 (Санитарно-технический институт). Готовый препарат представляет собой споровую культуру вакцинного бескапсульного штамма и предназначен для специфической профилактики сибирской язвы у людей и животных. В зависимости от показаний, вакцина вводится накожно или подкожно.

2. Чумная вакцина (EV) получена Г. Жираром и Ж. Робиком в 1931 г. длительным (5-летним) культивированием чумных бактерий на мясо-пептонном агаре при температуре 16-20°С.

Вакцина представляет собой взвесь живых бактерий вакцинного штамма в сахарозо-желатиновой среде, высушенной методом лиофилизации. Профилактические прививки чумной вакциной проводятся по эпидемическим показаниям накожным или подкожным способом.

3. Туляремийная накожная вакцина получена Н. А. Тайским и Б. Я. Эльбертом в 1942-1946 гг. методом селекции из лабораторных штаммов с ослабленной вирулентностью.

Вакцина вводится накожно (скарификационным методом) или внутрикожно (струевым методом при помощи безыгольного инъектора) при профилактике туляремии в эндемичных по этой инфекции Рамонах.

4. Бруцеллезная накожная вакцина получена П. А. Вершиловой методом селекции и представляет собой вакцинный штамм № 19 - ВА - слабовирулентный штамм Br. abortus, который обеспечивает иммунитет ко всем трем видам бруцелл.

Вакцинацию населения проводят в Рамонах неблагополучных по бруцеллезной инфекции (наличие бруцеллеза у крупного и мелкого рогатого скота или при выделении бруцелл от других домашних животных). Вакцину вводят только накожно.

5. Вакцина БЦЖ (франц.- BCG-Bacille Calmette Guerin) была получена в 1919 г. А. Кальметтом и М. Гереном длительным пассированием туберкулезных микобактерий бычьего типа на картофельно-глицериновой среде с добавлением желчи. Ими было сделано 230 пересевов в течение 13 лет и получен штамм со сниженной вирулентностью.

В настоящее время вакцина БЦЖ применяется для вакцинации новорожденных на 5-7-й день жизни и последующих ревакцинаций (в 7, 12 и 17 лет) при отрицательных туберкулиновых пробах. Вакцина вводится внутрикожно на наружную поверхность плеча левой руки.

Одним из показателей приобретенного иммунитета в результате вакцинации является переход отрицательной туберкулиновой пробы в положительную с учетом интенсивности реакции и продолжительности во времени с момента введения БЦЖ.

6. Оспенная дермальная вакцина. Вакцинацию против оспы впервые применил Дженнер Э. (1796), вводя здоровым людям инфекционный материал от больных оспой коров. Дженнер исходил из народного наблюдения, что доярки, заражающиеся от коров оспой, легко переболевают коровьей оспой и в дальнейшем не заболевают натуральной оспой.

В СССР для создания активного иммунитета против оспы применяют дермальную оспенную вакцину. Для получения вакцинного материала используют телят, на скарифицированную кожу которых наносят вирус осповакцины. На 5-й день в период максимального накопления вируса собирают соскабливанием оспенный детрит. Детрит гомогенизируют и обрабатывают фреоном 113 для удаления балластных веществ и сопутствующей микрофлоры. Вакцина выпускается со стабилизатором- пептоном, в высушенном виде; для растворения вакцины применяется 50% стерильный раствор глицерина, ампула которого прилагается к каждой вакцине. Вакцина наносится на скарифицированную кожу наружной поверхности плеча.

В настоящее время (с 1 января 1980 г.) обязательное оспопрививание отменено в связи с ликвидацией этого заболевания во всем мире.

7. Антирабическая вакцина. Вакцину против бешенства впервые получил в 1885 г. Л. Пастер пассированием вируса уличного бешенства на кроликах. Пастер провел 133 последовательных пассажа, вводя вирус бешенства интрацеребрально. Пассируя вирус от кролика к кролику, он добился снижения инкубационного периода бешенства у кроликов с 21 дня до 7 дней. Вирус, максимально адаптированный к центральной нервной системе кролика, получил название фиксированного вируса (virus fixe) и отличается от вируса уличного бешенства способностью вызывать заболевание у кроликов после короткого инкубационного периода (7-4 дня), большей активностью размножения в мозге (не вызывая образование телец Бабеша-Негри), не выделяется со слюной, и почти утратил свои патогенные свойства при подкожном введении кролику. В антигенном отношении virus fixe сохранил единство с уличным (диким) вирусом бешенства.

Инактивацию вируса fixe Пастер проводил дополнительным высушиванием кусочков мозга зараженных кроликов над парами едкого калия в разные сроки (от 1 дня до 16).

В настоящее время для лечебно-профилактических прививок против бешенства применяются следующие вакцины: антирабическая вакцина типа Ферми и культуральная антирабическая вакцина.

Вакцина Ферми представляет собой гомогенизированную суспензию мозга овец, зараженных вирусом fixe, на изотоническом растворе хлорида натрия с добавлением фенола. Вакцина содержит небольшое количество живого фиксированного вируса.

Инактивированная культуральная антирабическая вакцина (Института полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН

СССР) представляет собой фиксированный вирус бешенства штамм «Внуково-32», выращенный на культуре ткани почек сирийского хомяка и обезвреженный фенолом или ультрафиолетом.

Курс антирабических прививок назначают при укусах, царапинах, ослюнении бешеным или подозрительным на заболевание животным, а также при укусах летучих мышей, диких животных, бродячих собак и кошек (наблюдение за которыми невозможно). Вакцину вводят строго подкожно в область живота.

8. Полиомиелитная пероральная живая вакцина типов I, II, III (ЖВС) получена в 1958 г. А. Сейбиным из мелкобляшкообразующих вирусов полиомиелита. Аттенуированные вирусы дают мелкие бляшки под агаровым покрытием и обладают способностью размножаться при сравнительно низкой температуре (23°С).

Они потеряли способность размножаться в клетках нервной системы и сохранили энтеротропные свойства. Вакцинные штаммы вируса полиомиелита всех трех типов (I, II, III) выращиваются на первичных культурах почечных клеток африканских зеленых мартышек и выпускаются в форме конфет-драже (моновакцины и тривакцины, содержащие смеси вирусов трех типов) или в жидком виде.

Вакцина применяется для профилактической иммунизации против полиомиелита, начиная с 2-месячного возраста в соответствии с календарем прививок, последовательно с интервалом 4-6 недель (I, III, II типа). Вакцина принимается внутрь и запивается молоком или водой.

Вакцинный штамм вызывает вакцинальную инфекцию, так как вирус размножается в кишечнике и может передаваться другим людям, как и при естественном заболевании. Это очень ценное свойство вакцины, так как приводит к иммунизации всех тех лиц, которые еще не приобрели иммунитета к полиомиелиту.

9. Коревая вакцина представляет собой аттенуированный штамм вируса кори - Л-16 (выделенный в Ленинградском институте им. Пастера из крови ребенка, больного корью, и прошедший 23 пассажа на первичной культуре клеток почек морской свинки).

Вакцину приготавливают из культуральной жидкости при выращивании вакцинного штамма Л-16 на культуре клеток почек новорожденных морских свинок (или фибробластах

эмбрионов японских перепелок), освобождают от тканевых элементов и лиофилизируют.

Вакцинации подлежат дети в возрасте от 10 месяцев до 8 лет, препарат вводится подкожно под лопатку.

10. Гриппозная вакцина для интраназального применения представляет собой аллантоисную жидкость из куриных эмбрионов, зараженных вакцинными штаммами вируса, соответственно циркулирующим эпидемическим штаммом. Вакцина выпускается в виде моновакцины типов А 2 и В, вводится интраназально в осенне-зимний период, за 2-3 месяца до начала эпидемического подъема гриппа.

Вакцина вызывает бессимптомную вакцинальную инфекцию с развитием общего и особенно местного иммунитета, обусловленного появлением местных секреторных антител (IgA), которые препятствуют проникновению вируса в клетки.

Гриппозную вакцину для перорального введения получают при культивировании аттенуированных вакцинных штаммов вирусов гриппа на культуре клеток почек куриных эмбрионов в виде моновакцин типов А 2 и В. Пероральная вакцина вызывает вакцинальную инфекцию с развитием гуморального иммунитета.

11. Вакцина против желтой лихорадки (ВЖЛ). Препарат представляет собой живой аттенуированный вирус желтой лихорадки (штамм 17-Д), выращиваемый в курином эмбрионе или в культуре ткани из куриного эмбриона. Вакциной прививают лиц, постоянно проживающих в Рамонах, эндемичных по желтой лихорадке, и людей, выезжающих в эти районы. Привитые получают сертификат установленного ВОЗ образца. Препарат вводится подкожно в области верхней трети плеча.

12. Живая комбинированная сыпнотифозная вакцина Е (ЖКСВ-Е) представляет собой смесь аттенуированного штамма риккетсий Провачека (штамм «Мадрид Е»), выращенного в желточных мешках куриных эмбрионов, с растворимым антигеном, извлеченным из убитой вирулентной культуры риккетсий Провачека (штамм «Брейнль»), Вакцина вводится подкожно, по эпидемическим показаниям.

13. Вакцина против Ку-лихорадки (М-44) - мутант со сниженной вирулентностью, полученный при последовательном пассировании риккетсий Бернета в желточном мешке куршых эмбрионов на 44-м пассаже.

Вакцина вводится накожно, по эпидемическим показаниям, в Рамонах, где зарегистрированы случаи заболевания Ку-лихорадкой.

Убитые вакцины

Убитые - корпускулярные вакцины содержат взвеси бактерий, вирусов или риккетсий, инактивированных повышенной температурой или различными химическими веществами. Убитые вакцины применяются для профилактики инфекционных заболеваний, а также с лечебной целью (для стимуляции защитных свойств организма при хронических процессах).

Для получения убитых вакцин используют высокопатогенные штаммы, полноценные в отношении вирулентности и антигенного строения, отобранные после тщательного изучения. Бактериальные культуры при приготовлении вакцин выращивают в специальных реакторах с жидкой питательной средой, позволяющих получать одновременно сотни литров бактериальной взвеси.

Инактивация бактериальной массы проводится так, чтобы надежно убить бактерии с минимальным повреждением антигенных свойств. Так, гретые вакцины получают при прогревании бактерийной взвеси при 56°С, не более. При воздействии химических веществ соответственно готовят формалиновые, феноловые, спиртовые, ацетоновые вакцины.

Преимуществом убитых вакцин является относительная простота их получения, не требующая длительного выделения и изучения штаммов, большая устойчивость при хранении и более длительный срок пригодности. К недостаткам вакцин из убитых бактерий следует отнести их меньшую иммуногенность и необходимость двух или трехкратных прививок. А такие вакцины как формалинизированные еще и достаточно реактогенны, вызывая местную реакцию (боль, чувство жжения на месте введения) и общие явления с повышением температуры тела.

Иммунитет после введения убитых вакцин менее продолжителен в сравнении с иммунитетом, развивающимся после вакцинации живыми вакцинами.

В настоящее время применяются следующие убитые вакцины:

1. Брюшнотифозная спиртовая вакцина, обогащенная Vi - антигеном - комплексный препарат, состоящий из брюшнотифозных бактерий (инактивированных спиртом) и Vi - антигена S. typhi, который выполняет и роль растворителя. Vi - антиген - вещество полисахаридной природы, которое извлекается из брюшнотифозных бактерий (полноценного в антигенном отношении штамма Ту 2 4446).

Применяется по эпидемическим показаниям, преимущественно для детей (от 7 до 15 лет), вводится строго подкожно.

2. Брюшнотифозная гретая вакцина содержит взвесь тифозных бактерий, выращенных в реакторе в жидкой питательной среде (в условиях аэрации) и убитых в течение часа при 56°С. Вакцина вводится подкожно, только в подлопаточную область.

3. Холерная вакцина содержит 8 млрд. вибрионов биотипов Vibrio cholerae и Vibrio eltor типов Инаба и Огава (по 2 млрд. каждого биотипа каждого серологического типа), убитых нагреванием или формалином.

Вакцина вводится подкожно взрослым и детям (старше 2 лет), по эпидемическим показаниям, при неблагоприятной эпидемической обстановке.

4. Коклюшная вакцина содержит 20 млрд. коклюшных бактерий в гладкой форме (1 фаза), убитых формалином или мертиолатом. Как отдельная вакцина не применяется, а используется в составе ассоциированного препарата АКДС (см. с. 19).

5. Лептоспирозная вакцина представляет собой взвесь убитых нагреванием лептоспир, наиболее распространенных серологических типов (Leptospira icterohaemorragia, grippotyphosa, pomona, canicola).

Против лептоспироза вакцинируют людей в очагах инфекции, по эпидемиологическим показаниям. Препарат вводится подкожно.

6. Инактивированная культуральная вакцина против клещевого энцефалита включает в себя культуральный антиген вируса клещевого энцефалита, инактивированного формалином. Вакцина вводится подкожно.

Вакцины из убитых бактерий с успехом применяются и для лечения инфекционных заболеваний, имеющих характер хронического процесса (бруцеллез, хроническая дизентерия, хроническая гонорея, стафилококковые инфекции). Вакцины из убитых бактерий вводятся при недостаточной эффективности лекарственных препаратов, часто связанной со снижением антибиотикочувствительности возбудителей.

Действующим началом таких вакцин является микробная клетка с входящими в ее состав антигенами, которые стимулируют иммуногенез. При лечении убитыми вакцинами активируются фагоцитарные свойства лейкоцитов и клеток макрофагальной системы, усиливается иммуногенез. Действие вакцин строго специфично, применение индивидуально. Это связано с тем, что вакцинотерапия вызывает у больных, как правило, обострение инфекционного процесса. Применение получили следующие препараты.

1. Бруцеллезная жидкая вакцина - взвесь убитых нагреванием бруцелл (возбудителей бруцеллеза овечьего и бычьего типов).

Вакцину водят внутривенно при лечении больных бруцеллезом на всех стадиях заболевания - острой, подострой, хронической форме и в период ремиссий. Вакцина вызывает инфекционно-аллергическую перестройку организма.

2. Дизентерийная спиртовая вакцина представляет собой взвесь дизентерийных бактерий видов Флекснера и Зонне, убитых этиловым спиртом.

Дизентерийная вакцина применяется с целью лечения больных хроническими формами дизентерии (вне обострения), с поздно выявленными формами заболевания, по определенной схеме, указанной в наставлений. Вакцину вводят подкожно в подлопаточную область.

3. Гонококковая вакцина - взвесь гонококков нескольких (не менее 12) свежевыделенных штаммов, убитых нагреванием.

Применяется для лечения больных с хронической и острой формами гонореи, а также при различных осложнениях (гонорейные эпидидимиты, бартолениты, аднекситы, артриты). Вакцина вводится внутримышечно.

4. Стафилококковая вакцина представляет собой инактивированную (при 56°С в течение 2 час.) взвесь 10-12 патогенных стафилококков, выделенных от больных со стафилококковыми поражениями кожи. В 1 мл вакцины должно содержаться 2 млрд. микробных тел в 0,25%-ном феноле, добавляемом в качестве консерванта.

Стафилококковую вакцину используют с целью специфического лечения больных с различными заболеваниями стафилококковой этиологии (фурункулез, пиодермии, абсцессы, флегмоны и т. п.), причем вводить можно подкожно, внутримышечно и внутрикожно.

Для лечебных целей иногда применяют так называемые аутовакцины, которые получают в каждом отдельном случае специально из убитых бактерий возбудителей, выделенных от данного больного.

Химические вакцины

Химическими вакцинами принято называть препараты, содержащие наиболее активные по иммунологическим свойствам антигены, извлекаемые из микробных клеток различными методами (например, ферментативным перевариванием с последующим осаждением антигена этиловым спиртом). Следует помнить, что термин «химическая» вакцина не вполне соответствует своему названию, так как такие вакцины не являются химическими веществами в чистом виде, а представляют собой группы антигенов, эндотоксины и т. д.

Преимущество химических вакцин в том, что, во-первых, из микробных клеток выделяются иммунологически активные субстанции - изолированные антигены (комплекс - липополисахариды с полипептидами или протективные антигены), во-вторых, они менее реактогенны, в-третьих, стабильны и легче подвергаются стандартизации, что дает возможность более точно дозировать, и, наконец, четвертое - химические вакцины можно вводить в больших дозах и в виде ассоциированных препаратов.

Одним из недостатков химической вакцины являются небольшие размеры вводимых комплексов, что приводит к быстрому выведению их из организма и краткому антигенному раздражению. Поэтому химические вакцины вводятся на адъювантах (лат. adjuvans - помогающий), в качестве которых используются различные минеральные адсорбенты (гидрат окиси алюминия, фосфат кальция), минеральные масла. Адъюванты способствуют повышению эффективности вакцинации, так как они укрупняют антигенные частицы, создают в месте введения «депо», из которого происходит замедленная резорбция антигена, что приводит к перманентному антигенному раздражению. Кроме того, депонирующие вещества являются неспецифическими стимуляторами, вызывая приток плазматических клеток, непосредственно участвующих в выработке антител, что связано с развитием местного воспалительного процесса и стимуляции пролиферативной и фагоцитарной активности ретикуло-эндотелиальной системы.

В настоящее время в СССР выпускается и применяется химическая тифозно-паратифозная вакцина, которая готовится в нескольких вариантах в зависимости от состава включенных компонентов.

Анатоксины

Анатоксины (anatoxinum от греч.- «an» - отрицание и «toxo» - отравляю) представляют собой препараты, полученные из бактериальных экзотоксинов, полностью лишенные токсических свойств, но сохранившие антигенные и иммуногенные свойства. Метод получения анатоксина предложил в 1923 году крупнейший французский ученый Рамон (G. Ramon).

При приготовлении анатоксинов культуры бактерий - возбудителей токсинемических инфекций, продуцирующих экзотоксины, выращивают в жидких питательных средах (реакторах большой емкости) для накопления токсина. Затем фильтруют через бактериальные фильтры для удаления микробных тел.

К фильтрату добавляют 0,3-0,4 % -формалина и помещают в термостат при температуре 37°-40°С на 3-4 недели до полного исчезновения токсических свойств. Полученный анатоксин проверяют на стерильность, безвредность и иммуногенность.

Такие препараты получили название нативных анатоксинов, т. к. они содержат большое количество веществ питательной среды, которые являются балластными и могут способствовать развитию нежелательных реакций организма при введении препарата. Нативные анатоксины необходимо вводить в больших дозах из-за их невысокой удельной активности.

Поэтому в настоящее время применяются преимущественно очищенные анатоксины, для чего нативные анатоксины подвергают обработке различными физическими и химическими методами (ионнообменной хромотографии, кислотному осаждению и др.), чтобы освободить от всех балластных веществ и сконцентрировать препарат в меньшем объеме. Однако уменьшение размеров частиц анатоксина сделало необходимым адсорбировать препарат на адъювантах (см. с. 16). Таким образом, применяющиеся анатоксины являются адсорбированными высокоочищенными концентрированными препаратами.

Специфическую активность или силу анатоксина определяют в реакции флоккуляции в так называемых единицах флоккуляции - (Lf) или по реакции связывания анатоксинов, выражающуюся в единицах связывания- (ЕС).

Титрованиеанатоксиноввреакции флоккуляции (по методу Рамона) производят по стандартной флоккулирующей антитоксической сыворотке, в которой известно количество международных антитоксических единиц (ME, см. с. 23) в 1 мл. Одна антигенная единица анатоксина обозначается Limes flocculationis (Lf - порог флоккуляции), это то количество анатоксина, которое вступает в реакцию флоккуляции с одной единицей дифтерийного антитоксина. Определив дозу анатоксина, давшую инициальную (первичную) реакцию флоккуляции с одной антитоксической единицей сыворотки, рассчитывают количество Lf препарата в 1 мл.

Антигенные свойства столбнячного анатоксина (и некоторых других) обозначают в единицах связывания (ЕС). Для определения ЕС необходимы: испытуемый препарат анатоксина, стандартная антитоксическая сыворотка (с содержанием 0,1 ME в 1 мл), опытная доза токсина (вытитрованная к 0,1 ME стандартной сыворотки), белые мыши.

Реакцию связывания проводят следующим образом: в ряд пробирок с одинаковым объемом стандартной сыворотки добавляют различные разведения испытуемого анатоксина. Смесь для связывания выдерживают в термостате 45 минут, затем в каждую пробирку добавляют опытную дозу токсина и вновь оставляют в термостате на 45 минут. После этого из каждой пробирки вводят смесь (сыворотки - анатоксина - токсина) 2-4 мышам и наблюдают за состоянием животных в течение 4 суток. Если весь анатоксин, добавленный к сыворотке, связался ею, то добавление токсина и последующее заражение мышей ведет к их гибели. При недостаточной дозе анатоксина для связывания всей сыворотки, добавленный токсин нейтрализуется сывороткой, и мыши остаются живыми.

Для расчета ЕС в 1 мл определяемого анатоксина берется то разведение анатоксина, при котором происходит гибель

50% белых мышей на 4-е сутки. Это количество анатоксина содержит дозу, связывающую 0,1 ME сыворотки.

Анатоксины применяются для профилактики и реже для лечения токсинемических инфекций (дифтерия, газовая гангрена, ботулизм, столбняк) и некоторых заболеваний, вызванных стафилококками.

Анатоксины выпускаются в виде монопрепаратов и в составе ассоциированных вакцин, предназначенных для иммунизации против нескольких заболеваний.

1. Дифтерийный анатоксин адсорбированный представляет собой фильтрат токсигенного штамма дифтерийной палочки «Парк Вильяме 8», обезвреженный по методу Рамона. В 1 мл анатоксина содержится 60 Lf (флоккулирующих единиц).

Применяется для профилактики дифтерии в виде моноанатоксина, чаще в составе АДС или АКДС

2. Столбнячный анатоксин сорбированный - препарат, полученный из фильтрата бульонной культуры столбнячной палочки, обезвреженный по методу Рамона при 40°С.

В 1 мл столбнячного анатоксина содержится не менее 20 ЕС.

Применяется в составе АКДС для иммунизации против столбняка детей в возрасте от 6 месяцев до 5 лет с последующими ревакцинациями.

3. Дифтерийно-столбнячный анатоксин адсорбированный

(АДС) содержит 60 Lf дифтерийного и 20 ЕС столбнячного анатоксина.

АДС используют вместо вакцины АКДС при отсутствии необходимости иммунизации против коклюша.

4. Адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС) содержит коклюшные бактерии I фазы, убитые мертиолатом, дифтерийный и столбнячный анатоксины и служит для иммунизации детей против соответствующих инфекций. В 1мл АКДС содержится 30 Lf дифтерийного анатоксина, 10 ЕС столбнячного анатоксина и 20 млрд коклюшных микробных тел.

5. Адсорбированный стафилококковый анатоксин - фильтрат бульонной культуры стафилококков, обезвреженный по методу Рамона. Препарат должен содержать 10 ЕС в 1 мл.

Анатоксин применяют для профилактики и лечения различных воспалительных процессов, вызываемых стафилококками.

6. Ботулинический анатоксин выпускается в виде полиана-токсина, в препарате содержатся анатоксины, полученные из экзотоксинов возбудителя ботулизма А, В, С, Е.

Для специфической профилактики полианатоксин рекомендуется вводить работникам лабораторий, имеющих контакт с ботулотоксином.

7. Анатоксины из экзотоксинов возбудителей газовой гангрены CI. perfringens и CI. novii входят в состав комплексного препарата - сорбированной брюшнотифозной вакцины с секстаанатоксином.